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25考研农学考研复习：蛋白质的抽提原理及方法
分离纯化的一般程序可分为：前处理、粗分级和细分级分离三个步骤。
A前处理步骤：将欲分离纯化的目的蛋白质从细胞中溶解出来。胞外蛋白质可以直接用缓冲液提取，胞内蛋白质的提取涉及破碎细胞等步骤，再通过离心除去大的细胞碎片等。
B粗分级：这个阶段主要是除去大量的杂质和杂蛋白。一般采用的方法有中性盐或有机溶剂的分级沉淀的方法，以及超过滤等浓缩的方法。
C细分级：对目的蛋白质进一步的提纯。通常采用各种柱层析的方法，如：离子交换层析、凝胶过滤层析、吸附层析、疏水相互作用层析、反相层析等，还可以采用制备性电泳的方法。这一阶段常常同时进行生物活性的检测和纯度的鉴定。
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