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25考研农学考研复习:核酸的变性及复性
1)变性:在一定条件下,受到某些物理和化学因素的作用,DNA的双螺旋结构破坏,氢键断裂,碱基有规律的堆积被破坏,双螺旋松散,双链分离成两条缠绕的无定形的多核苷酸单链的过程称为变性。
2)复性:变性DNA在适当条件下,两条分开的互补单链重新形成双螺旋结构的过程称为复性。缓慢冷却复性的过程称为退火。
3)增色效应与减色效应、熔解温度、分子杂交的概念
A增色效应:变性DNA分子双螺旋结构破坏,碱基充分外露,其紫外吸收增加的现象。
B减色效应:变性DNA分子复性重新形成双螺旋结构,其紫外吸收降低的现象。
C熔解温度Tm:DNA变性时,OD260增大。通常把加热变性使DNA双螺旋结构失去一半时的温度称为该DNA的熔解温度,或者当增色效应达到一半时的温度。
D核酸的分子杂交:来源不同的两条具有碱基互补序列的单链核酸分子,通过退火复性,碱基互补区段按照碱基配对原则结合在一起形成双链的过程称为核酸的分子杂交。杂交过程可以发生在DNA单链之间、RNA单链之间以及DNA单链与RNA单链之间。
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